Attrice misurata ed eclettica, Anna Maestri studia recitazione alla Scuola d'arte drammatica "S. D'Amico" fino al 1941, anno in cui decide di trasferirsi a Trento per combattere nella Resistenza. Esordisce sul palcoscenico nel 1945 con Sogno di una notte di mezza estate di Shakespeare e con Spirito allegro di Noel Coward al fianco di Rina Morelli e Paolo Stoppa. In seguito interpreta con successo opere di autori del teatro classico e contemporaneo, distinguendosi per un certo brio e una elegante sobrietà nella recitazione. È stata interprete di grandi testi, come Delitto e castigo di Gaston Baty da Dostoevskij, Il campiello e Le baruffe chiozzotte di Goldoni, e Un tram chiamato desiderio di Tennessee Williams. Nel 1963 le viene conferito il premio "S. Genesio" come migliore interpretazione femminile in Otto donne di Robert Thomas. All'attività teatrale ha affianca quella cinematografica: l'attrice interpreta infatti numerose pellicole, soprattutto del genere brillante, come Totò cerca moglie (1950), Totò, Eva e il pennello proibito (1959), Torna a settembre (1960) e Lui, lei e il nonno (1961). Da ricordare, infine, le sue apparizioni televisive, come nello spettacolo musicale Biblioteca di Studio Uno (1964) diretto da Antonello Falqui, e nello sceneggiato Buio nella valle (1984) per la regia di Giuseppe Fina.